IL-1β及其I型受体在大鼠肺纤维化发生过程中的动态表达

　　肺纤维化是多种不明原因的肺间质疾病的共同结局，近年来其发病呈增多趋势。由于机制不清，至今仍缺乏治疗肺纤维化的有效手段，其病死率较高，预后较差，加强对其发病机制的研究，并在此基础上发展新的治疗策略已成为非常迫切的现实需要。

　　目前国内外多数学者认为，炎症细胞及其释放的多种细胞因子在肺纤维化的发病机制中起中心环节的作用。IL-1β是体内作用最强的前炎症细胞因子之一，广泛参与机体多种疾病的发生和发展。

　　有研究报道，在肺纤维化的动物模型和特发性肺间质纤维化患者的支气管肺泡灌洗液中均可检测出高水平的IL-1β，然而IL-1β及其主要受体在肺纤维化发病过程中具体是如何动态变化的尚不知晓。

　　本实验通过复制肺纤维化动物模型研究IL-1β及其I型受体在肺纤维化发生中的动态变化规律，从而为进一步探索肺纤维化的发生机制及临床治疗提供新的理论依据。

　　1材料与方法 1.1材料 1.1.1试剂 博来霉素A2，甲强龙，ELISA试剂盒。 1.1.2 动物 健康雄性Wistar大鼠90只，体重(200+-20)g，随机分为正常组、模型组和甲强龙组，各30只，均购自山西医科大学动物中心。

　　1.2方法 1.2.1制备模型 模型组和甲强龙组气管内注入BLMA2生理盐水0.3ml(5mg/kg);正常组注入生理盐水0.3ml。次日起，甲强龙组每天腹腔注入甲强龙生理盐水0.3ml(15mg/kg)，其他两组注入生理盐水0.3ml。

　　1.2.2收集标本 分别于造模后第1、3、7、14、28天处死每组大鼠各6只，采集腹主动脉血，1500r/min离心10min，留取血清待测;收集支气管肺泡灌洗液，1500r/min离心10min，取上清液待测;留取右肺制备HE染色病理切片。 1.2.3指标测定 按照ELISA试剂盒说明书操作。

　　1.3统计学处理数据以均数+-标准差表示，采用SPSS15.0软件分析。多组间比较用单因素方差分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

　　2结果 2.1镜下病理观察正常组各时间点均未出现明显病变。模型组3d时出现炎症细胞浸润;7d时肺泡间隔增厚，成纤维细胞增多;14d时肺泡炎症仍重，纤维组织进一步增加;28d时炎症减轻，肺纤维化程度加重，肺组织实变。甲强龙组肺泡炎症和纤维化出现晚且程度轻。

　　2.2BALF中IL-1β及IL-1RI含量 BALF中IL-1β第1天时变化不明显，3d时有所升高，7d时达到高峰，14d时显著下降，28d时接近正常组。其I型受体的变化规律与IL-1β基本一致。

　　2.3血清中IL-1β及IL-1RI的含量血清中IL-1β第1天时无明显变化，7d时明显升高，并达到峰值，此后开始下降，28d时基本降至正常水平。IL-1RI的表达呈现出与IL-1β基本相同的变化规律。

　　3讨论肺纤维化是一种以肺泡结构破坏、大量纤维组织增生为基本病理改变的疾病，其发生包括早期的肺泡炎症阶段和后期的肺纤维化阶段。肺组织病理切片是诊断肺纤维化的“金指标”。博来霉素诱发的肺纤维化动物模型是目前公认最接近人肺间质纤维化的实验模型。

　　故本实验应用博来霉素制备大鼠肺纤维化模型，观察发现7d时肺泡炎症明显，28d时形成纤维化，与Na的报道一致，说明动物模型制备成功。 IL-1β主要由活化的单核-巨噬细胞产生，是机体前炎症免疫反应的主要诱导剂。

　　本研究发现，IL-1β在大鼠肺纤维化发生的早期表达增加，并于肺泡炎症阶段达到峰值，而随着肺纤维化的进一步发展又显著下降，并达到正常水平，提示IL-1β主要在肺纤维化发生的早期其作用，它可能在肺纤维化的发生中起诱导反应的作用。

　　IL-1β主要通过与IL-1R结合后通过G蛋白耦联机制发挥作用，IL-1R分为两型;IL-1RI和IL-1RII，均属免疫球蛋白基因超家族。

　　两者最显著的差异在于其胞质部分，及胞内片段的长短，这种差异允许IL-1RI而不是IL-1RII参与细胞内信号转导。

　　本实验发现，在肺纤维化的发生过程中，IL-1RI的表达规律与IL-1β基本一致，表现出相同的时序性变化，提示在肺纤维化发生的早期，IL-1β的表达显著增高时，IL-1RI的含量也增加，并同时达到峰值，以利于IL-1β充分发挥其生物学效应，介导肺纤维化的发生。

　　本实验提示，IL-1β在致损伤因子的作用下表达增加，并可能通过与I型受体结合介导肺组织的炎症损伤及纤维修复过程。目前临床上用于治疗肺纤维化的药物有很多，但大多用于对症治疗，并没有从根本上遏制肺纤维化的发生及发展。

　　虽然这些药物对肺纤维化有一定的治疗作用，但是从本质上抑制肺纤维化发生的靶向治疗仍是我们所期待的，我们可以通过早期阻滞IL-1β的表达或者拮抗其与受体的结合达到遏制肺纤维化的发生及发展的目的。

（实习编辑：张丽娟）

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